细菌内毒素的检测方法有哪些？

一、家兔检测法

1923年Seibert提出用家兔检测热原方法，1942年美国药典首先将家兔法作为药品的热原检查，为保障药品质量和用药安全发挥了重要作用。

目前，对于热原的概念国内外仍未有*统一的认识。但综合国内外文献报道，普遍认为热原的本质就是细菌内毒素的脂多糖。WHO 文件中同样提到，药品中的热原就是指细菌内毒素，至少在药检范围内控制内毒素就是控制热原。严格地讲，不是每一种热原都具有脂多糖( lipoplysaccharide，LPS)的结构，在药品生产质量管理规范条件下，药品生产的质量控制一般可以接受的观点是:不存在细菌内毒素意味着不存在热原。多年来研究表明，热原进入人体血液循环系统后，并不直接引起发热和其他毒性反应，但它可使细胞释放内源性热原物质。这种内源性热原可直接作用于中枢神经系统，刺激体温中枢，引起机体发热。

最早作为热原检测法的家兔检测法也就成为人们检测内毒素的最早方法。此方法即将一定量的被检标本静脉注入家兔体内，观察其注射后的发热情况，以决定所检标本中有无热原存在。

家兔检测法为一种定性检测内毒素的方法，应用历史较久。但随着社会的进步、科技的发展，制药工业飞速前进，新药品种不断增加，临床用药要求越来越高，家兔法局限性日益突出。如家兔对内毒素在反应上有个体差异，敏感度不高，不能定量检测内毒素等等，因此家兔检测法现在已经很少使用。

二、GC/MS检测方法

气相色谱和质谱联用法是上个世纪出现的一种内毒素检测方法。此法主要依据细菌内毒素的主要毒性部分类脂A水解时产生一种3-羟基脂肪酸的物质。这种物质是内毒素所*的，并不存在于其他自然界的物质当中。每分子的类脂A含有4摩尔的3-羟基脂肪酸，类脂A的平均分子量为8000。通过对这种特异性3-羟基脂肪酸的检测，可以定量检测内毒素的含量。由于仪器的限制，气质联用的方法很难成为常规的细菌内毒素检测方法。目前只应用于科研，对空气的质量检测等方面。

三、鲎试剂检测方法

我国药典收载的细菌内毒素检测方法为鲎试验法，包括2种方法，即凝胶法和光度测定法，后者又包括浊度法和显色基质法。当各种检测法得到的检测结果不一致时，以凝胶法的检测结果为准。

鲎试验法有定性和定量之分，其按试验方法还可进一步分为凝胶法、动态浊度法、终点浊度法、动态显色法和终点显色法。