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鲎试验法中的干扰因素有哪些?

发布时间: 2022-11-10  点击次数: 113次

试验的反应机理我们可以知道内毒素在二价阳离子参与下作用凝集酶系统而发生一系列生化反应最后形成凝胶。因此一切阻碍反应机制的因素均干扰凝胶的形成,形成假阴性结果作为干扰凝集反应的物质主要有人血中的多种凝血因子、很多中药成分、某些生化药品、抗生素、可使蛋白质变性的物质、高糖溶液、络合物等等此外样品的pH值,反应温度等也都有一定的影响2

 

 

另外一些金属离子 FeAlCa会对细菌内毒素活性产生影响从而出现假阴性结果因此在实验时避免使用一些金属用具而使用玻璃用具。

 

关于供试品中自身成分的影响,可以说是试验中影响因素最大的,作为供试品,既有对LALTAL试剂的活性产生影响的因素也有对细菌内毒素的活性产生影响因素因此在实际测定时要引起注意。

 

1供试品对试剂的活性产生影响的因素为蛋白酶、蛋白酶抑制作用螯合剂、蛋白变性剂等。

 

2供试品对细菌内毒素的活性产生影响的因素金属离子铁、铝、锗等),表面活性剂等。

 

3对主反应以外的测定系统产生影响的场合浊度、颜色、磺胺制剂合成基质化的偶氮化反应时等。

 

 

在这些共存物质的影响当中,特别要引起注意的是些外界金属离子的影响,尤其是在旧菌内毒素标准品的溶解及稀释过程中一定特别注意金属离子的混入,最-好的方法是使用玻璃制备的盖子。

 

对于大多数的注射剂般在原液时均存在干扰作用,然而当把样品用水进行稀释后即可排除干扰,而对于稀释法不能排除干扰的样品可考虑用其他方法给予解决。如中和法、过滤法以及透析方法等,目前市场上见到试剂主要为TAL试剂和LAL试剂。因为工艺不同抗干扰能力的强弱不一因此对同一样品、使用不同厂家的LAL试剂所出现的最大无干扰浓度是不同的这一点要引起注意。另外TAL试剂和LAL试剂是否完-全等活性关系还有待进一步研究和探讨。


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