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动态显色法鲎试剂在操作过程中要注意以下几点

发布时间: 2022-12-19  点击次数: 61次
  动态显色法鲎试剂兼有动态浊度法鲎试剂和终点法显色基质鲎试剂的优点。不需要凝固蛋白原形成凝胶,根据显色反应来准确定量细菌内毒素,抗干扰能力强,特别适用于生物样本的检测,如疫苗、抗体、蛋白质、核酸、临床样本等的内毒素分析。
  
  动态显色法鲎试剂的质量主要表现于其灵敏度、自凝时间与成胶状态三个方面:灵敏度稳定;自凝时间不低于24h;具有一定的缓冲能力与合适的pH;反应后即形成坚实凝胶,将成胶安瓿翻转180°而不会被破坏。而质量稍差的鲎试剂存放一定时间后(如半年)其灵敏度可能发生变化,而灵敏度的改变会使测定结果所反映的供试品中内毒素的允许限值发生变化。
 
  

动态显色法鲎试剂

 
 

  动态显色法鲎试剂在操作过程中要注意以下几点:
  
  1、实验室要求洁净、无尘埃流通;检验人员同时注意卫生的保持。在整个使用操作过程中应防止微生物的污染,例如空气的流动,人员的口沫、汗液污染等。
  
  2、鲎试剂开启、溶解和配制时应尽量避免将安瓿外瓶壁脏物、瓶壁碎片、砂轮锯屑等异物混入鲎试剂中,避免鲎试剂外损。
  
  3、鲎试剂中含有多种蛋白质,用力振摇会产生气泡,一旦起泡难以消除,而影响检测的准确性,所以在整个操作过程中都要轻力以避免因过分震动而引起的误差。
  
  4、量取和加样反应物时,一定要加到试管底部接近鲎试液而不接触鲎试液的管壁处。
  
  5、生成凝胶的最适pH值为6~8,对于氯化钠注射液、葡萄糖注射液(5%,10%)等注射液,不需考虑供试液的pH值,而检查其他制剂时,尤其是一些本身缓冲能力较强或偏酸、碱的供试品,应考虑供试品的pH值。
  
  6、使用时要严格控制温度和时间。当鲎试剂一加入内毒素及样品混合液中时反应已开始,并在一定的温度范围内,反应温度越高,反应速率越大;保温时间的增长,也会提高鲎试剂的灵敏度,增加假阳性的发生,导致较大误差。因此,要注意控制温度的变化和保温时间。
  
  7、保持实验器具的洁净。每次检验完毕,应及时将玻璃器具充分清洗后于250℃干热灭菌处理,待烤箱温度升至设定的温度后开始计时,干烤至少1h。也可用其他经确证不干扰细菌内毒素的检查的适宜方法。对于塑料、橡胶等不耐热器材可用30%双氧水浸泡4h,用无热原水冲洗,70℃干燥备用。
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