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内毒素的检测——鲎试验法

发布时间: 2022-08-03  点击次数: 37次

内毒素为革兰氏阴性细菌及其它一些微生物如衣原体、立克次氏体、螺旋体、单核细胞增多李斯特菌等胞壁中的类脂多糖(LipopolysaccharideLPS)成分。内毒素对机体有极为广泛的作用,可影响到机体几乎每一个器官、系统及生物功能。内毒素对机体有多种毒害作用,如热原性,致死作用,白细胞减少及增多,斯氏反应,弥漫性血管内凝血(DIC),骨髓坏死,胚胎骨质耗损,血压下降,血小板凝聚,补体激活Hageman因子激活,诱导血浆原激活剂促进前列腺素的合或抑制糖原异生的关键骨骼肌加速释放氨基酸等等。因此,临床上革兰氏阴性菌感染或脓毒症时,如并发毒血症和内毒休克可有许多病理现象出现。最终可因心、肾、肺、肝等功能的衰竭而发生死亡。

 

由于很小剂量的内毒素即能引起极广泛的生物作用及病理作用因此,加强对内毒素检测的研究便成为临床、公共卫生、药检系统等领域的重要课题之一。在临床上加强对革兰阴性菌感染或革兰氏阴性菌菌血症、脓毒症时血清中内毒素检测有利于及时发现内毒素休克的发生,以迅速采取果断的治疗。在公共卫生及药检系统等面,对水源、食品、饮料、各种药物及生物制品进行内毒素检测,可严格控制水源水、食品、饮料、各种药物、生物制品中的内毒素含量,以将其控制在可接受的法定水平以下,有利于保证人民的身体健康。

 

 

鲎试验法

 

LT法又称变形细胞溶解物试验Limulus amoebocyte lysateLAL,是目前检测内毒最敏感的方法。它比RT法敏感10100倍以上,可测出微量的内毒素(0.011 ng/m1 ) 用微光电法及其它的改进方法可测到微微克Pg/ml的水平。而在RT法中敏感性高的家兔需注射1.5ng/kg才能引起发热而敏感性低的却需注射0.5-10ug/ kg才能引起发热。

 

LT法可广泛地用于兰氏阴性菌感染的快速诊断,对患者的血液、尿液及脑脊液可进行直接的检查。此法亦可用于检查各种注射剂内是否有内毒素污染。近十多年来,随着各种先进的手段如同位素标记技术光电技术、免疫电泳技术等应用LT领域使LT法得到了许多改进,敏感性又日益提高。

 

总之,从目前来看,LT法为检测内毒素的最好方法。其主要优点就是敏感性高假阳性少,耗费的试剂量少,且设备简单实验时间短,适用于临床、卫生事业及药检系统大规模地进行。如能解决好试剂、内毒素及操作程序的标化问题,则LT法将是检测内毒素的最好方法。

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