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鲎试验的方法——比浊法

发布时间: 2022-08-10  点击次数: 132次

比浊法又称浊度测定法。浊度法系利用检测鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化而测定内毒素含量的方法。

 

 

Teller等首先报导将试剂与内毒素作用后,可产生凝胶从而使液体呈混浊,其浊度与内毒素在一定条件下(内毒素浓度20100pg/ ml)呈线性关系。此法有如下优点①减少了试剂的用量②快速③操作简便,④半自动化。

 

本试验的方法是:将已适当稀释后的试剂与处理后的被检标本各0.1ml加入微孔中,振颤器振动60秒钟,使两者充分混匀放置3760分钟,然后取出在分光光度计360380nm处读取光密度值(OD)。另以系列稀释的标准内毒素作阳性对照,并将其OD值与内毒素量间的关系描成标准曲线。比较试验管与对照管的OD值,即可知道标本中内毒素的含量。

 

在操作中,孵育的时间是至关重要的,因为随着时间的延长,浊度亦将增加,一般孵育1小时即可终止其反应。即使在室温中,如时间过长浊度亦会增加,因此孵育后应立即读取OD值。读取OD值时,应每隔1分钟进行一次,共四次,取其平均值,变异系数应不超过1%

 

另外,某些注射药品及放射性药物本身带有颜色或浊度时,必须减去标本本身的OD值。


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