热门搜索:鲎试剂,内毒素检测仪,内毒素检测试剂盒,基因重组鲎试剂,浊度法鲎试剂,显色法鲎试剂,凝胶法鲎试剂,葡聚糖缓冲液,无热原水,鲎试剂耗材
技术文章 / article 您的位置:网站首页 > 技术文章 > 凝胶法常用方法之试管法

凝胶法常用方法之试管法

发布时间: 2022-10-20  点击次数: 670次

在凝胶法中,经常使用的方法就包括试管法。

 

那在凝胶法中,试管法的使用方法是怎么样的呢?

 

首先需要把供试品和鲎试剂等量加入试管中,轻摇晃使其充分混匀,再将该试管置于水浴中静置,取出后再观察该试管的凝胶是否形成。试验时,需要作试验管、阳性对照管、阴性对照管及阴性抑制对照管共4种,来作对照试验。

 


1.试验管

 

需要取出0.1ml的样本和0.1ml的鲎试剂。水、注射液等一般样本在试验前是不需要进行处理的,但是如果血液、腹腔渗出液等其他液体就必须在试验前就进行处理,因为这些样本可能存在鲎试验法反应的抑制物。所用的鲎试剂需要在试验前就对其以标准内毒素进行校准,且是可以进行试验的。

 

2.阳性对照管

 

分别取出0.1ml的标准内毒素和0.1ml的鲎试剂,在使用标准内毒素是应以WHO标准品进行校准标定。在实验中应用的内毒素浓度需要根据鲎试剂的灵敏度来确定,一般来说,范围在15 ng/ ml即可。

 

3.阴性对照管

 

只需取0.1ml的无热原水和0.1ml的鲎试剂即可。

 

4.抑制对照管

 

需要取0.1ml的供试品和0.1ml的标准内毒素和0.2ml的鲎试剂。

 

上述四管均放入37℃孵育1~2小时观察结果。如形成凝胶坚固,试管倒转180度不变形,则记为(++);如混浊度和粘滞性明显增加,呈胶体状,但倾斜试管时变形,则记为(+);如液体流动自如,透明无变化或稍混浊,有少量颗粒细絮片状物,则记为(-)。

 

 

以上对照的4支试管需要在37℃的环境中静置1~2个小时,再对试管进行观察,以此来得出结果。如果试管中形成的凝胶是凝固的,且将试管翻转180度都不会变形时,则该试管被记为(++);但是如果试管出现了混浊的情况而且试管内还有粘滞性的情况,整体是呈胶体状的,将试管倾斜时液体也会呈倾斜,则记为(+),如果整个试管的液体是非常流动的,且试管内部呈透明色或者只有轻微混浊,且出现了些许颗粒细絮物,则记为(-)。

 

 

如果供试品中出现了抑制物,可以把供试品进行处理,比如将其进行稀释,或者用其他方法将抑制物清除,再重新进行检测。如果这些方法都没有效果的话,还可以采取其他细菌内毒素检测方法,比如家兔法(Rabbit pyrogen test)。


  • 联系电话电话400-687-1881
  • 传真传真010-87875015
  • 邮箱邮箱f.he@bio-life.com
  • 地址公司地址北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地华佗路50号院18幢楼2层
  • 公众号二维码
© 2024 版权所有:科德角国际生物医学科技(北京)有限公司(www.acciusacnn.com)   备案号:京ICP备2021012680号-1   网站地图   技术支持:化工仪器网