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除去血中干扰物质的前处理方法

发布时间: 2022-12-05  点击次数: 135次

一般来说由于血液的组成比较复杂,其中的许多物质尤其是高等动物的血浆或血清对TALLAL试剂与内毒素反应很强的干扰作用。因此当我们对这类样品的内毒素进行测定时必须将其中的干扰物质除去后方可进行检测。

 

目前作为血浆中的干扰物质主要有各种蛋白酶抑制剂、内毒素结合蛋白以及纤溶酶原抑制剂等物质,对于比色法由于Xa因子能分解 Boc-LEU-Gly-Arg-PNA 肽链。因此在测定前排除这些干扰物是十分必要的。

除去血中干扰物质的前处理方法主要有以下几种,现分别介绍如下

 

1稀释加热法血浆用溶解水进行3~10倍稀释然后在37 ~ 100℃水中进行加热处理。保温时间一般在5~10分钟

2氯仿提取法血浆加等量的氯仿振动3小时然后取上层进行检测

3)乙-醚处理法血浆加入乙-醚处理并在40℃保温将乙-醚去除

4三氟代乙酸法血浆中加入乙酸调节pH4.0后用K2HPO4调节pH7~7.5

5表面活性剂处理法同稀释加热法一样只是将稀释用水改为表面活性剂

6凝胶过滤法

7碱性处理法血浆用0.2NNaOH37℃保温10分钟后用HCl中和

8高氯酸法PCA或新高氯酸法New PCA);

9Beads将吸附内毒素的特殊树脂放入血浆中,取出后加入LAL试剂进行反应。

 

 

在这些方法中常用的主要有氯仿提取法、稀释加热法以及高氯酸PCA法和新高氯酸New PCA其中前两种方法由于内毒素回收率﹑假阳性等问题的存在因此在测定时需要探讨PCANew PCA,由于添加内毒素的回收率好,目前在日本主要用于临床前处理。

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