单核细胞活化反应测定试验(MAT)系利用单核细胞或单核细胞系模拟人体,以细菌内毒素标准品为基准,检测并比较由标准品与供试品分别作用于单核细胞或单核细胞系所产生的活化反应,以释放的促炎症细胞因子(如IL-6、IL-1β、TNF-α)量来评价供试品中热原污染情况,从细菌内毒素标准量效曲线得出的内毒素浓度可等效于热原污染物浓度。
单核细胞活化反应测定试验(MAT)可检测的热原包含内毒素和非内毒素的热原,包括引起人发热的细菌、病毒、真菌等。
本法不适用于本身能刺激或抑制单核细胞促炎症因子的释放以及对细胞增殖有明显影响的供试品。
本法操作过程应防止微生物和热原的污染。
性能特点:
1、属于体外热原检测,是家兔体内热原检测的替代品,不使用实验动物,符合3R原则;
2、对比家兔热原检测,MAT法更省时、更准确、更经济;
3、可以检测内毒素和非内毒素热原(NEPs);
4、灵敏度高,重复性好,应用灵活性更高;
5、生物制品内毒素检测遇到低内毒素回收(LER)问题时,可以用MAT热原检测替代内毒素检测;
试剂盒组分与储存条件
细胞
组分名称 | 产品号 | 规格 | 数量 | 储存条件 |
细胞 | MAT001 | 1 mL/支 | 2 | 低于-150 ℃保存; -80 ℃可用于短暂保存 |
MAT盒组成部分
组分名称 | 产品号 | 规格 | 数量 | 储存条件 |
96孔细胞培养板 | MAT002 | - | 1 | 2–8 °C |
RPMI-1640 | MAT003 | 50 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
IL-6 微孔板 | MAT004 | 8孔*12条 | 1 | 2–8 °C |
30×浓缩生物素化抗体 | MAT005 | 400 μL/管 | 1 | 2–8 °C |
生物素化抗体稀释液 | MAT006 | 16 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
30×浓缩酶结合物 | MAT007 | 400 μL/管 | 1 | 2–8 °C |
酶结合物稀释液 | MAT008 | 16 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
20×浓缩洗涤液 | MAT009 | 50 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
显色底物(TMB) | MAT010 | 12 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
反应终止液 | MAT011 | 12 mL/瓶 | 1 | 2–8 °C |
封板胶纸 | MAT012 | 6 张 | 1 | 2–8 °C |
MAT标准品
组分名称 | 产品号 | 规格 | 数量 | 储存条件 |
细菌内毒素国家标准品(单核细胞活化反应测定用) | MAT013 | 150 EU/支 | 1 | -20 ℃ |
应用场景
生物制药:疫苗、抗体、基因治疗产品的放行检测。
医疗器械:植入物、透析液等热原风险监控。
研发阶段:快速筛选配方或包材的相容性。
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